Трансгенными могут называться те виды растений, в которых успешно функционирует ген (или гены) пересаженные из других видов растений или животных


Перенос ДНК с помощью агробактерий



Скачать 42.94 Kb.
страница8/8
Дата14.02.2020
Размер42.94 Kb.
Название файлаполучение трансген. раст.docx
Учебное заведениеСибирский государственный университет науки и технологий
ТипРеферат
1   2   3   4   5   6   7   8

3.2 Перенос ДНК с помощью агробактерий

Другая, наиболее распространенная группа методов – трансформация с помощью A. tumefaciens или A. rhizogenes, имеющих генно-модифицированные плазмиды Ti или Ri.

Трансформация in vitro. При агробактериальных методах переноса используется, как правило, метод совместного культивирования эксплантов в течение некоторого времени (обычно 2–3 суток) с суспензией агробактерии, а затем экспланты переносят для регенерации каллуса или прямого побегообразования на среду, содержащую антибиотики для подавления роста бактерий. Большие экспланты – это, как правило, участки органов, содержащих огромное число клеток: листья и стебли, сегменты гипокотилей и семядольные листья проростков, соцветия и различные части цветка, сегменты корней. Малые экспланты — микроспоры и проэмбрио, а также одиночные клетки, образовавшиеся из протопластов.

Этот метод достаточно универсален и пригоден для многих видов растений, хорошо образующих регенеранты. Таким способом к настоящему времени получено большинство трансгенных растений различных генотипов. Однако сложностей хватает и при использовании агробактериальной трансформации. Основными трудностями являются — отсутствие универсальных методов переноса генов в клетку, сложность получения соответствующих систем культуры тканей и регенерации растений, необходимость подбора соответствующего штамма агробактерии. В каждом конкретном случае приходится подбирать строго индивидуальные условия для каждого генотипа растения.

Трансформация in planta. Агробактериальную трансформацию можно проводить, инфицируя растения через поранение ткани каким- либо острым инструментом, на котором находятся агробактерии, например, уколов препаровальной иглой апикальную меристему проростка или пазушную почку растения. Побег, выросший из такой почки, затем срезают и высаживают на селективную среду, чтобы отобрать трансформированные растения.

Другой способ трансформации in planta – через нанесение суспензии агробактерий с активированными vir-генами на пестики цветков растений с последующим опылением пыльцой, собранной с других растений того же сорта. Так можно трансформировать, например, кукурузу или любое другое растение, имеющее достаточно большой пестик. Для растений арабидопсиса, имеющих очень маленькие цветки, разработан метод трансформации путем опускания нераскрывшихся цветочных бутонов в агробактериальную суспензию. Дальнейший отбор трансформированных растений проводят, высевая образовавшиеся после трансформации семена в селективных условиях. Метод трансформации in planta имеет преимущество перед классической процедурой трансформации, поскольку при этом можно избежать некоторых стадий культивирования тканей и последующей регенерации. Однако этот метод очень трудоёмок, т.к. частота трансформации при его использовании очень мала и требуется проведение очень большого объема работ.



Заключение


Список использованных источников



Поделитесь с Вашими друзьями:
1   2   3   4   5   6   7   8


База данных защищена авторским правом ©genew.ru 2020
обратиться к администрации

    Главная страница
Контрольная работа
Курсовая работа
Лабораторная работа
Рабочая программа
Методические указания
Практическая работа
Методические рекомендации
Теоретические основы
Пояснительная записка
Общая характеристика
Учебное пособие
История развития
Общие сведения
Физическая культура
Теоретические аспекты
Практическое задание
Федеральное государственное
Направление подготовки
Теоретическая часть
Техническое задание
Самостоятельная работа
Образовательная программа
Общие положения
Методическая разработка
Дипломная работа
государственное бюджетное
квалификационная работа
Технологическая карта
Выпускная квалификационная
Техническое обслуживание
учебная программа
Решение задач
Исследовательская работа
История возникновения
Методическое пособие
Краткая характеристика
Рабочая учебная
Общие требования
Общая часть
История создания
Основная часть
Метрология стандартизация
Рабочая тетрадь
Современное состояние
Название дисциплины
Техническая эксплуатация
Информационная безопасность
Организация работы
Математическое моделирование
Внеклассное мероприятие
Экономическая теория